版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

登錄注冊

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進行實名認(rèn)證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號能夠正常使用，請盡快對帳號進行手機號驗證，感謝您的理解與支持！

24小時熱門版塊排行榜

北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

返回列表

yangxijia

新蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 16
帖子: 9
在線: 3.7小時
蟲號: 2414179
注冊: 2013-04-12
專業(yè): 發(fā)育生物學(xué)

[求助] 『求助』酶活測定遇到困難

在次向各位牛人求助：
最近在做一個脂酰CoA合成酶的酶活分析，體系是60 mM PBS containing 10 mM MgCl2, 5 mM ATP, 2.5 mM DTT, 1 mM CoASH, 0.1 mM fatty acid和2ug的重組蛋白，30度反應(yīng)1h；蛋白只有一個his tag，理論上不會對活性有太大影響，但用LC—MS根本測不到一點產(chǎn)物，分析了好久也找不到原因，真的是走投無路啊。由于CoA是水溶的，所以不知道里面的鹽離子會不會產(chǎn)生影響，不知道有什么好的抽提萃取方式。

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

0805求調(diào)劑已經(jīng)有5人回復(fù)
342求調(diào)劑已經(jīng)有7人回復(fù)
調(diào)劑已經(jīng)有6人回復(fù)
一志愿北京科技大學(xué)085601材料工程英一數(shù)二初試總分335求調(diào)劑已經(jīng)有3人回復(fù)
273求調(diào)劑已經(jīng)有4人回復(fù)
339求調(diào)劑已經(jīng)有3人回復(fù)
267求調(diào)劑已經(jīng)有7人回復(fù)
070300化學(xué)279求調(diào)劑已經(jīng)有11人回復(fù)
318求調(diào)劑已經(jīng)有3人回復(fù)
309分085801求調(diào)劑已經(jīng)有4人回復(fù)

» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:

求助：過氧化物酶提取及活性測定，顏色、吸光度都無變化已經(jīng)有9人回復(fù)
求助：纖維素合成酶酶活性測定方法，謝謝！已經(jīng)有4人回復(fù)
求助，如何用發(fā)光法測定酶活Km值已經(jīng)有4人回復(fù)
酶活性測定已經(jīng)有16人回復(fù)
求助文獻！關(guān)于基因與酶活性中心關(guān)系以及酶活性中心測定文獻已經(jīng)有5人回復(fù)
【求助】求助半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和絲氨酸蛋白酶活性測定方法已經(jīng)有11人回復(fù)
【求助】求助關(guān)于土壤蛋白酶和蔗糖酶測定所遇到的問題已經(jīng)有14人回復(fù)
【求助】果膠酶活力的測定已經(jīng)有22人回復(fù)
【求助/交流】固氮菌的固氮能力測定一般是用什么方法��？已經(jīng)有17人回復(fù)
【求助/交流】關(guān)于血管緊張素轉(zhuǎn)化酶體外活性測定方法已經(jīng)有4人回復(fù)
【求助】蛋白酶活力測定已經(jīng)有7人回復(fù)
【求助/交流】ATP合成酶酶活測定已經(jīng)有5人回復(fù)
【求助/交流】滴定法測脂肪酶活性已經(jīng)有13人回復(fù)
【求助/交流】過氧化物酶活性的測定() 已經(jīng)有6人回復(fù)
【求助/交流】如何測定酶活力的半衰期已經(jīng)有5人回復(fù)
【求助/交流】葡萄糖氧化酶酶活的測定方法已經(jīng)有17人回復(fù)
【求助/交流】微生物纖維素酶活測定已經(jīng)有11人回復(fù)
【求助】超氧化物歧化酶活性測定方法已經(jīng)有5人回復(fù)
【求助】納豆激酶活性測定已經(jīng)有18人回復(fù)
【求助】土壤脲酶活性測定中的問題已經(jīng)有47人回復(fù)
求助谷胱甘肽還原酶活性測定方法已經(jīng)有11人回復(fù)

1樓 2013-05-22 22:15:56

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

yyy0305

至尊木蟲 (著名寫手)

BioEPI: 2
應(yīng)助: 114 (高中生)
金幣: 9560.5
散金: 50
紅花: 30
帖子: 1481
在線: 383小時
蟲號: 1571969
注冊: 2012-01-10
性別: GG
專業(yè): 生物技術(shù)藥物

【答案】應(yīng)助回帖

沒產(chǎn)物，樓主的反應(yīng)沒成功啊。分析原因可能有這幾個：
1.酶本身的問題，是不是你酶的量或者活力太差
2.配置的buffer里面是否有其他陽離子干擾，和Mg離子產(chǎn)生競爭性抑制
3.建議緩沖液由PBS換成Tris-Hcl 試試

贊一下

回復(fù)此樓

2樓2013-05-31 00:07:27

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn) 我要訂閱樓主 yangxijia 的主題更新