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yangxijia新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
『求助』酶活測(cè)定遇到困難
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在次向各位牛人求助： 最近在做一個(gè)脂酰CoA合成酶的酶活分析，體系是60 mM PBS containing 10 mM MgCl2, 5 mM ATP, 2.5 mM DTT, 1 mM CoASH, 0.1 mM fatty acid和2ug的重組蛋白，30度反應(yīng)1h；蛋白只有一個(gè)his tag，理論上不會(huì)對(duì)活性有太大影響，但用LC—MS根本測(cè)不到一點(diǎn)產(chǎn)物，分析了好久也找不到原因，真的是走投無(wú)路啊。由于CoA是水溶的，所以不知道里面的鹽離子會(huì)不會(huì)產(chǎn)生影響，不知道有什么好的抽提萃取方式。 |
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yyy0305
至尊木蟲(chóng) (著名寫手)
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- 專業(yè): 生物技術(shù)藥物
2樓2013-05-31 00:07:27
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