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damo8912銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
90bp小片段的回收
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| 90bp的片段膠回收檢測(cè)什么也沒(méi)有。回收試劑盒上寫(xiě)著小于400bp的加等凝膠體積的異丙醇，加異丙醇后明顯能看到有沉淀析出，想問(wèn)一下加異丙醇的作用是什么，還有那個(gè)沉淀是什么，還有回收這樣的小片段有什么好的方法呢。 |
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hlwnxfd2011
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2樓2013-05-25 16:08:23
anygene_seq
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【答案】應(yīng)助回帖
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myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，感謝你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:22:00
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myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，感謝你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:22:00
| 加入異丙醇就是為了沉淀析出，沉淀就是DNA，所有DNA都是不溶于異丙醇。建議你加入異丙醇，混勻后放入-20度靜置30min，然后12000冷凍離心10min，去掉上清，用少量溶膠液洗滌管壁DNA，再反復(fù)過(guò)柱2次。應(yīng)該能回收到，一般的膠回收柱對(duì)于小片段回收率都很低的。你還可以用橋式PCR試試，測(cè)序公司一般都是這樣做的。 |
4樓2013-05-25 22:35:24
wangpeng227
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damo8912
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