 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4789 | 回復(fù): 8 | |||
生化與分子新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
目的基因片段膠回收后酶切，然后再跑膠后發(fā)現(xiàn)條帶很弱，怎么改進(jìn)（求助）
|
| 我要做目的基因的超表達(dá)，構(gòu)建載體的第一步就遇到了困難，我在克隆了目的基因跑膠后做雙酶切，然后再跑膠，發(fā)現(xiàn)目的條帶很弱，根本沒有回收的必要了，怎么改進(jìn)才能得到較亮的酶切條帶？請各位幫忙提點兒建議，不勝感激！ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 實驗交流 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有180人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 高保真酶擴(kuò)出目的基因后，如何高效加尾（最好提供加尾體系）
已經(jīng)有7人回復(fù)
- （基因克�。╇p酶切結(jié)果與目的條帶大小不一致，求有經(jīng)驗的人幫幫我。
已經(jīng)有4人回復(fù)
- PBI121 與目的片段連接后轉(zhuǎn)入DH5α，長出的菌落提取質(zhì)粒都是空載，求原因
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 目的基因和表達(dá)載體連接不上，求指導(dǎo)！�。�
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 膠回收時跑不出條帶
已經(jīng)有65人回復(fù)
- 目的片段與表達(dá)載體怎么都連接不上
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 載體構(gòu)建，測序結(jié)果顯示目的基因全突變，克隆入T載體，菌液PCR全是假陽性
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 克隆轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化子就是不含目的基因。
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 長片段連接問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 110bp小片段DNA的酶切后回收純化問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- pcr產(chǎn)物膠回收濃度低，能不能和T載體連接
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 短基因片段合成的相關(guān)問題求助
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 克隆目的基因
已經(jīng)有11人回復(fù)
- （侯氏出品）雙酶切連接反應(yīng)之全攻略
已經(jīng)有89人回復(fù)
- 【資料】分子生物學(xué)常見問題解答
已經(jīng)有30人回復(fù)
- 克隆基因和載體連接后轉(zhuǎn)化至大腸桿菌，為什么每次涂板都是空平板沒有菌落？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【原創(chuàng)】原創(chuàng)之六：環(huán)境樣品總DNA的提取與純化【已搜索無重復(fù)】
已經(jīng)有178人回復(fù)
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 1662 (講師)
- 金幣: 8693.8
- 紅花: 72
- 帖子: 3516
- 在線: 456小時
- 蟲號: 1614001
- 注冊: 2012-02-13
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2012-10-31 07:37:21
huangguoqing
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 31 (小學(xué)生)
- 金幣: 3524.6
- 散金: 100
- 紅花: 3
- 帖子: 356
- 在線: 305.1小時
- 蟲號: 909932
- 注冊: 2009-11-22
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因組學(xué)
3樓2012-10-31 10:34:16
考研生涯
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 13 (小學(xué)生)
- 金幣: 3515.7
- 散金: 130
- 紅花: 1
- 帖子: 714
- 在線: 342.9小時
- 蟲號: 1271180
- 注冊: 2011-04-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化工與食品化工
4樓2012-10-31 11:06:14
david0308
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 4068.1
- 散金: 58
- 紅花: 5
- 帖子: 708
- 在線: 388.3小時
- 蟲號: 1603917
- 注冊: 2012-02-07
- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)生物學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵交流 2012-10-31 15:18:42
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵交流 2012-10-31 15:18:42
| 兩種解決方案：1.一般來說如果PCR產(chǎn)物是單一條帶的話，可以直接PCR產(chǎn)物回收，然后做雙酶切，這樣又簡單產(chǎn)率也很高而且可以避免更多的突變產(chǎn)生。如果你的目的基因是在文庫中拉的話那么其實第二步也可以直接產(chǎn)物回收的。2.如果擔(dān)心純度問題的話，最好還是割膠回收，但是呢，要加大PCR的量，而且在膠回收的過程中可以適當(dāng)?shù)母倪M(jìn)，比如說膠回收在過柱子的過程中可以反復(fù)過濾3遍，提高產(chǎn)率，DDH2O少加一點，也可以的。 |
5樓2012-10-31 13:19:25
★
myprayer: 金幣+1, 屏蔽內(nèi)容, 應(yīng)樓主要求，屏蔽咯 2013-05-12 15:55:45
myprayer: 金幣+1, 屏蔽內(nèi)容, 應(yīng)樓主要求，屏蔽咯 2013-05-12 15:55:45
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
6樓2013-05-12 10:12:31
7樓2013-06-11 19:30:17
xipha
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 41 (小學(xué)生)
- 金幣: 4332.1
- 紅花: 12
- 帖子: 881
- 在線: 160.1小時
- 蟲號: 447837
- 注冊: 2007-11-01
- 專業(yè): 生物化學(xué)
8樓2013-11-16 03:16:35
yayasci
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 4.6
- 帖子: 19
- 在線: 4.8小時
- 蟲號: 2851088
- 注冊: 2013-12-05
- 專業(yè): 基因組學(xué)
9樓2013-12-08 22:18:57
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 生化與分子 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 279分求調(diào)劑 一志愿211 +18 | chaojifeixia 2026-03-19 | 20/1000 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 超級伊昂大王 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
[考研] 材料292調(diào)劑 +4 | 橘頌思美人 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 08工學(xué)調(diào)劑 +7 | 用戶573181 2026-03-20 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | 懷瑾握瑜l 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +6 | shansx 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 305分求調(diào)劑（食品工程） +4 | Sxy112 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +6 | 金恩貝 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +5 | @taotao 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +5 | 紅衣隱官 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | 鳳凰院丁真 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | wyyyqx 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 二本跨考鄭大材料306英一數(shù)二 +3 | z1z2z3879 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 324分 085600材料化工求調(diào)劑 +4 | llllkkkhh 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)，327分，材料與化工085600 +9 | Ncdx123456 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +4 | 小材化本科 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩337求調(diào)劑 +3 | niko- 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑，是學(xué)校就去 +8 | sllhht 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑招人�。�！ +3 | 山海天嵐 2026-03-17 | 4/200 |
|