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panl234銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
基因組DNA電泳圖,求高手講解。! 已有1人參與
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| 這是我從293細(xì)胞中提取的基因組DNA電泳圖(見附件),marker是DL2000。我看了別人的電泳結(jié)果,都是很高的位置,從上向下彌散,為什么我的結(jié)果正好相反,片段總是很小,從下向上彌散?而且在每個(gè)泳道的兩個(gè)邊緣有彌散的細(xì)紋?基因組DNA應(yīng)該是很大的片段。∏蟾呤种笇(dǎo)~~~ |
分子生化實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)積累 |
銀蟲 (小有名氣)
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
銀蟲 (正式寫手)
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1、10 cm-plate細(xì)胞,200 ul SDS裂解buffer冰上裂解10min。 2、8 ul 5M NaCl 及10 ul 蛋白酶K,65 ℃消化過夜。 3、200 ul TE稀釋SDS,加500 ul 酚:氯仿:異戊醇混合物,劇烈混勻,RT,5 min,12000 rpm, 4℃,離心15min。 4、取上清,加500 ul氯仿,抽提2次。 5、取上清,加500 ul 異丙醇,-20 ℃沉淀30 min。 6、12000 rpm離心10 min,1ml 70 %乙醇漂洗。 7、12000 rpm離心5 min,棄上清。室溫晾干10 min。 8、30 ul ddH2O 溶解。 |
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