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panl234銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
基因組DNA電泳圖，求高手講解�。�！ 已有1人參與
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| 這是我從293細(xì)胞中提取的基因組DNA電泳圖（見附件），marker是DL2000。我看了別人的電泳結(jié)果，都是很高的位置，從上向下彌散，為什么我的結(jié)果正好相反，片段總是很小，從下向上彌散？而且在每個泳道的兩個邊緣有彌散的細(xì)紋？基因組DNA應(yīng)該是很大的片段��！求高手指導(dǎo)~~~ |
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2013-05-28 21:29:21, 1.25 M
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 分子生化實驗經(jīng)驗積累 |
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panl234
銀蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 放射醫(yī)學(xué)
|
1、10 cm-plate細(xì)胞，200 ul SDS裂解buffer冰上裂解10min。 2、8 ul 5M NaCl 及10 ul 蛋白酶K，65 ℃消化過夜。 3、200 ul TE稀釋SDS，加500 ul 酚：氯仿：異戊醇混合物，劇烈混勻，RT，5 min，12000 rpm， 4℃，離心15min。 4、取上清，加500 ul氯仿，抽提2次。 5、取上清，加500 ul 異丙醇，-20 ℃沉淀30 min。 6、12000 rpm離心10 min，1ml 70 %乙醇漂洗。 7、12000 rpm離心5 min，棄上清。室溫晾干10 min。 8、30 ul ddH2O 溶解。 |
4樓2013-05-29 10:43:21
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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2樓2013-05-29 07:24:17
wangqi1107
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3樓2013-05-29 09:20:46
5樓2014-04-22 21:13:00
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