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NEVER000木蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR及引物設(shè)計求助
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| 我想將我的目的基因中的一段（約45bp）,直接用外源基因替換（36bp）怎樣設(shè)計引物？謝謝 |
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bullfrog325
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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這個原理和制造點突變是一樣的, 你的基因英愛已經(jīng)在一個質(zhì)粒里面了吧? 參考site-directed mutagenesis. 連個引物方向背對背, 它們的5'分別識別要改的那45b兩側(cè), 它們的3'則是要替換的那36bp. 這36bp不用全部出現(xiàn)在引物序列里, 但是兩個引物之間必須有大概20bp重疊. 如果基因序列還沒有克隆到質(zhì)粒里, 那就考慮融合PCR. |
2樓2013-05-29 19:21:41
NEVER000
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3樓2013-06-11 21:28:22
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