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824191848新蟲 (初入文壇)
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[交流]
瓊脂糖凝膠電泳圖分析 已有8人參與
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各位大神。。最近在做PCR，然后瓊脂糖凝膠電泳。。膠跑成了這樣。。請(qǐng)問(wèn)各位這可能是為什么。。希望大家伸出援助之手啊。。小弟剛剛開始做這方面。。 01.JPG |
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zhoulubin
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2樓2013-06-01 14:39:58
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是啊。。。新手 ，膠濃度是1.5%的，上樣量是6微升。從右邊依次是marker，然后剩下四條帶分別是用兩種不同引物擴(kuò)增自己用試劑盒提取的質(zhì)粒的產(chǎn)物，第一條和第三條是同一種引物，第二條和第四條是同一種引物。感覺是不是拖尾有點(diǎn)嚴(yán)重。。而且從左邊數(shù)的第二條帶怎么會(huì)有那么亮的一條。。  PCR程序是：94度 5min 94度 45s 59度 45s 72度 45s 29循環(huán) 72度 10min 反應(yīng)體系應(yīng)該問(wèn)題不大吧，我按照PCR試劑盒的說(shuō)明書的量加的 試劑 終濃度 50 µl體系 Sterilized ddH2O - 20.8 µl 10×PCR Buffer 1× 5 µl dNTP Mix 0.2 mmol/L 5 µl Primer 1 1 µmol/L x 5 µl Primer 2 1 µmol/L x 5 µl Taq DNA Polymerase 1 U 0.2 µl MgCl2 4 mmol/L 8 µl 模板 10 pg-1 µg 1 µl 多謝�。�！ |
3樓2013-06-01 15:06:15
zhoulubin
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