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lumingyang金蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助：大豆基因組3000bpDNA擴(kuò)增，P不出來
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大豆基因組DNA，欲擴(kuò)增3K目標(biāo)基因，先拿Taq試PCR溫度和其他條件，拿別人設(shè)計的目標(biāo)產(chǎn)物是1K左右的引物作為對照，55-62度梯度PCR。結(jié)果是5的溫度梯度對照（1K）都P出來了，我的三對引物都木有P出來。20的體系：10umol的左右引物各5，模板2，dNTP 2， Taq 0.2 ，Buffer 2， ddH2O 13.4. PCR：94 4min; 94 30sec, 60 30sec, 72 3min, 35cycles; 72 10min; 25 forever.求大神分析接下來該怎么改進(jìn)，怎么才能P出來 梯度PCR-5.5.jpg |
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孫小爽
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5樓2013-08-29 08:38:18
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