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thinkerboy

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[求助] 熒光定量擴(kuò)增效率問(wèn)題

最近在做相對(duì)熒光定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線，機(jī)器是ABI stepone但是其中有個(gè)基因的擴(kuò)增效率達(dá)到121了并且有一個(gè)點(diǎn)的兩個(gè)重復(fù)之間ct值超過(guò)了0.2.
請(qǐng)高手幫我看看擴(kuò)增效率怎么這么高，我如果提高退火溫度擴(kuò)增效率會(huì)不會(huì)小點(diǎn)。

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1樓 2013-06-13 11:14:49

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thinkerboy

鐵蟲(chóng) (小有名氣)

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2樓: Originally posted by love_st at 2013-06-13 11:54:04
我感覺(jué)兩個(gè)方面，閾值太高，還有就是似乎梯度稀釋的不是太好

閾值是系統(tǒng)自己設(shè)定的，梯度稀釋我只稀釋了4個(gè)梯度。

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3樓2013-06-13 14:37:31

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love_st

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myprayer: 金幣+1, Send one rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-06-13 13:41:14

我感覺(jué)兩個(gè)方面，閾值太高，還有就是似乎梯度稀釋的不是太好

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2樓2013-06-13 11:54:04

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引用回帖:

3樓: Originally posted by thinkerboy at 2013-06-13 14:37:31
閾值是系統(tǒng)自己設(shè)定的，梯度稀釋我只稀釋了4個(gè)梯度。...

能否手動(dòng)設(shè)定，你梯度如果是10倍稀釋的話，感覺(jué)不是很好

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4樓2013-06-13 14:52:41

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songzuowei

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【答案】應(yīng)助回帖

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kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2013-06-13 19:23:21
thinkerboy: 金幣+2 2013-06-17 15:09:42

你這個(gè)單從擴(kuò)增效率來(lái)看是稍微不太理想 slope 是-2.8 左右不是很好另外你這個(gè)溶解曲線重合的也不是很好表明引物設(shè)計(jì)的特異性不是很高

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5樓2013-06-13 16:41:03

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