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776142金蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于堿法裂解提取DNA
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| 在使用合成的材料做大腸桿菌提取DNA的實(shí)驗(yàn)時(shí)，使用2ml pYD1的質(zhì)粒在250bp以下處總出現(xiàn)亮帶，OD值大于2.0，酶標(biāo)儀測(cè)定含量得到了30微克，而用試劑盒才得到了6微克左右。操作過程中使用的是堿法裂解溶液1,2,3，都經(jīng)過滅菌處理，而且嚴(yán)格按照冰浴、溫和操作和時(shí)間控制等，然后12000g離心得到上清液，加入到我的萃取材料中振蕩吸附，用1M的氯化鈉洗脫，再加入2.5倍的乙醇沉淀-20度30分鐘，20微升無菌水溶解。并且在加完溶液1,2，3后離心得到的上清液的OD值也在2.1左右，這里不知道對(duì)不對(duì)，希望有懂的同學(xué)幫助一下。曾經(jīng)得到過正確的結(jié)果電泳圖下方無雜帶，OD值1.91得到了5微克，就是一直沒重復(fù)出來。 |
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德國(guó)工兵鏟
金蟲 (小有名氣)
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2樓2013-06-18 09:02:28
776142
金蟲 (正式寫手)
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3樓2013-06-18 09:16:18
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