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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 關于堿法裂解提取DNA
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776142金蟲 (正式寫手)
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[求助]
關于堿法裂解提取DNA
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| 在使用合成的材料做大腸桿菌提取DNA的實驗時，使用2ml pYD1的質粒在250bp以下處總出現(xiàn)亮帶，OD值大于2.0，酶標儀測定含量得到了30微克，而用試劑盒才得到了6微克左右。操作過程中使用的是堿法裂解溶液1,2,3，都經過滅菌處理，而且嚴格按照冰浴、溫和操作和時間控制等，然后12000g離心得到上清液，加入到我的萃取材料中振蕩吸附，用1M的氯化鈉洗脫，再加入2.5倍的乙醇沉淀-20度30分鐘，20微升無菌水溶解。并且在加完溶液1,2，3后離心得到的上清液的OD值也在2.1左右，這里不知道對不對，希望有懂的同學幫助一下。曾經得到過正確的結果電泳圖下方無雜帶，OD值1.91得到了5微克，就是一直沒重復出來。 |
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2樓2013-06-18 09:02:28
776142
金蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 無機材料化學
3樓2013-06-18 09:16:18
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