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776142金蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于堿法裂解提取DNA
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| 在使用合成的材料做大腸桿菌提取DNA的實驗時,使用2ml pYD1的質(zhì)粒在250bp以下處總出現(xiàn)亮帶,OD值大于2.0,酶標儀測定含量得到了30微克,而用試劑盒才得到了6微克左右。操作過程中使用的是堿法裂解溶液1,2,3,都經(jīng)過滅菌處理,而且嚴格按照冰浴、溫和操作和時間控制等,然后12000g離心得到上清液,加入到我的萃取材料中振蕩吸附,用1M的氯化鈉洗脫,再加入2.5倍的乙醇沉淀-20度30分鐘,20微升無菌水溶解。并且在加完溶液1,2,3后離心得到的上清液的OD值也在2.1左右,這里不知道對不對,希望有懂的同學幫助一下。曾經(jīng)得到過正確的結(jié)果電泳圖下方無雜帶,OD值1.91得到了5微克,就是一直沒重復(fù)出來。 |
金蟲 (正式寫手)
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