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[求助]
菜鳥求助:PCR擴(kuò)增和擴(kuò)增產(chǎn)物的克??
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書上如是說:在許多研究中,需要將PCR產(chǎn)物克隆,以獲得目的DNA片段。 我不明白的地方是,要獲得目的DNA片段就是通過PCR。PCR的產(chǎn)物就是DNA片段,要將產(chǎn)物克隆就是要獲得更多的片段,繼續(xù)PCR不就行了么?? 我理解的是PCR的產(chǎn)物中只有兩條模板鏈?zhǔn)情L的,其他的都是短的對嗎?可以P出與模板鏈一樣長的鏈嗎?? 菜鳥問題,大蝦見笑 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

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關(guān)于你的這段話的2個(gè)問題: 1 PCR就是對目的DNA的富集過程。如果只想做多態(tài)性研究就不必做克隆,但以下情況需要你做克隆:a:要測序的目的片段較短,需要連到載體克隆后測序;b:認(rèn)為目的基因內(nèi)存在雜合位點(diǎn),堿基的缺失和突變等情況;c:下一步試驗(yàn)的需要,比如需要對目的基因進(jìn)行功能研究 ; 2 既然PCR是目的DNA富集的過程,經(jīng)過30輪左右的指數(shù)定增過程,最終PCR產(chǎn)物中都是您的目的DNA大小的DNA片段。 |
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