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[求助] 熒光定量引物疑問(wèn)

新手準(zhǔn)備做熒光定量PCR呢，大家看看這對(duì)引物咋樣啊，有啥問(wèn)題沒(méi)有啊，小弟不是很懂的，希望大家指導(dǎo)、拍磚。還有一問(wèn)題就是這個(gè)錯(cuò)配是啥情況��？求解

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1樓 2013-07-04 21:12:41

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金蟲 (著名寫手)

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617004340: 金幣+1, ★有幫助 2013-07-05 12:44:42

可以嘗試下，雖然二聚體G值較高，但是也是在中間，可能也不會(huì)有產(chǎn)物，頂多就是引物用多點(diǎn)而已

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5樓2013-07-05 09:35:13

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myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香。分子生物版塊期待你的精彩和更詳細(xì)的解答。 2013-07-04 22:24:17
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哥們，這引物就別用了。。。ΔG越小說(shuō)明結(jié)合越穩(wěn)定。。最好別出現(xiàn)小于-5的。。你這引物明顯都是引物錯(cuò)配，。，換吧。。選擇分?jǐn)?shù)高

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2樓2013-07-04 21:37:33

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617004340: 金幣+1, ★有幫助 2013-07-06 15:39:07

錯(cuò)配就是在模板或者引物上，在你設(shè)計(jì)引物的位置之外，還有某個(gè)地方，引物結(jié)合上去的可能性也很大。。

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3樓2013-07-04 21:39:10

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引用回帖:

2樓: Originally posted by 武穆大成 at 2013-07-04 21:37:33
哥們，這引物就別用了。。。ΔG越小說(shuō)明結(jié)合越穩(wěn)定。。最好別出現(xiàn)小于-5的。。你這引物明顯都是引物錯(cuò)配，。，換吧。。選擇分?jǐn)?shù)高

這個(gè)就是最好的啊，其他的都有發(fā)卡結(jié)構(gòu)和二聚體的，我都不知道該咋整了

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4樓2013-07-05 09:33:10

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