 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » EMSA/ChIP » EMSA實驗問題
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3902 | 回復: 4 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
EMSA實驗問題
|
|||
|
最近在做EMSA實驗，請教一個問題：做這個實驗跑非變性膠時為啥不用考慮蛋白質(zhì)的等電點呢，無論是酸性蛋白還是堿性蛋白都是用pH8.3的緩沖液？ [ Last edited by silicare on 2014-2-26 at 16:32 ] |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 生物科學系列 |
» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有276人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有15人回復
-
化學工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 關于Hs tag 蛋白純化后蛋白不純的問題
已經(jīng)有6人回復
- 請教大家有關找靶點的一個問題，謝謝你們了~~~
已經(jīng)有3人回復
- 怎么確定一種物質(zhì)是某一受體的配體？
已經(jīng)有3人回復
- 請教各位前輩關于EMSA（gel shift）的問題！
已經(jīng)有6人回復
- EMSA非放射性地辛高標記
已經(jīng)有5人回復
- 求助，Western-Blot轉膜不成功
已經(jīng)有22人回復
- gel-shift蛋白結合DNA的問題
已經(jīng)有23人回復
- 【求助/交流】什么是核蛋白什么是總蛋白？做western的時候有什么區(qū)別？
已經(jīng)有7人回復
- 浙江大學2007/2008年博士生入學分子生物學（甲）試題
已經(jīng)有10人回復
- 請教EMSA的有關問題
已經(jīng)有9人回復
- 基金申請策略和技巧（中大）
已經(jīng)有21人回復
5樓2017-03-25 19:27:50
fuyuandj86
版主 (著名寫手)
己所不欲，勿施于人
- 應助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.015
- 金幣: 7578.5
- 散金: 495
- 紅花: 60
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 1313
- 在線: 1387.3小時
- 蟲號: 544795
- 注冊: 2008-04-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學
- 管轄: 生物科學
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖應助！ 2013-07-24 23:16:09
...山雨: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-07-25 17:43:35
感謝參與，應助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖應助！ 2013-07-24 23:16:09
...山雨: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-07-25 17:43:35
|
只要你蛋白不沉淀就沒事吧. 我理解EMSA是看的DNA或者RNA,只要DNA或者RNA結合到蛋白上,整個復合體就會帶負電荷.因為DNA或者RNA的磷酸基團帶有大量負電荷,蛋白的酸性堿性比起來不算什么.而且在大部分EMSA里只能看到Free DNA和Bound DNA的條帶,所以不在乎只有蛋白的條帶會跑到哪里. |
2樓2013-07-24 22:28:21
beimi
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 29 (小學生)
- 金幣: 6040.3
- 散金: 2075
- 紅花: 33
- 帖子: 2460
- 在線: 540.2小時
- 蟲號: 947085
- 注冊: 2010-01-22
- 性別: GG
- 專業(yè): 細胞信號轉導
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖應助！ 2013-07-25 12:48:56
...山雨: 金幣+7, ★★★很有幫助 2013-10-29 10:59:27
...山雨: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-10-29 10:59:52
感謝參與，應助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖應助！ 2013-07-25 12:48:56
...山雨: 金幣+7, ★★★很有幫助 2013-10-29 10:59:27
...山雨: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-10-29 10:59:52
|
First if you use the denature gel the protein and DNA will separate, so then all the samples are the same. so you do not know your protein bind to your DNA or not. second, it is not need to consider protein PI, because of shit you will know the binding of your protein to the DNA of interest. If you get the shit, that means your get the results, of course you should do some negative control. good luck! |
3樓2013-07-25 01:50:29
4樓2013-07-25 17:47:44
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工272求調(diào)劑 +4 | 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +6 | 宋明欣 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
[考研] 277跪求調(diào)劑 +5 | 1915668 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 化學調(diào)劑 +4 | 愛吃番茄的旭 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | Sanmu-124 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +6 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學338求調(diào)劑！ +6 | Zuhui0306 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +5 | 江辭666 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 349求調(diào)劑 +4 | 李木子啊哈哈 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +6 | wfh030413@ 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +7 | prayer13 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 總分293求調(diào)劑 +6 | 加一一九 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿中南大學化學學碩0703總分337求調(diào)劑 +7 | niko- 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +3 | wcq131415 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 鵝鵝鵝額額額額?/a> 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 300求調(diào)劑，材料科學英一數(shù)二 +5 | leaflight 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料/農(nóng)業(yè)專業(yè)，07/08開頭均可，過線就行 +3 | 呵唔哦豁 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 384求調(diào)劑 +3 | 子系博 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 280分求調(diào)劑 一志愿085802 +4 | PUMPT 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 呼呼？~+123456 2026-03-21 | 3/150 |
|