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lifuzhu3838金蟲 (小有名氣)
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[求助]
酵母表達蛋白在發(fā)酵時降解了
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我有個構(gòu)建好的酵母,小試表達蛋白約為8mg/L,然后就上10L的發(fā)酵罐。正常來說,因為發(fā)酵罐菌密度比小試的能增加10倍,那就能得到8mg/L*10*10L=800mg的目的蛋白?墒前l(fā)酵只得到了70mg! 酵母誘導(dǎo)的時候有一段營養(yǎng)真空期,可能會死一些菌,就會分泌一些蛋白酶,我這蛋白的結(jié)構(gòu)比較松散,現(xiàn)在就懷疑是發(fā)酵的時候被蛋白酶降解了,但是也不知道怎么確定!然后確定了,我又該怎么辦呢?求蟲友幫忙啊 |

金蟲 (小有名氣)

木蟲 (正式寫手)
| 你不能根據(jù)小試和發(fā)酵罐的比較來確定你的蛋白真被降解了,因為兩個系統(tǒng)完全不同,發(fā)酵條件不同,對其蛋白表達必然有所影響。除非你發(fā)現(xiàn)蛋白量隨著發(fā)酵時間增加,然后又降低了。想提高表達量,個人覺得你可以優(yōu)化一下發(fā)酵條件,good luck! |

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