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lifuzhu3838金蟲 (小有名氣)
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[求助]
酵母表達(dá)蛋白在發(fā)酵時降解了
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我有個構(gòu)建好的酵母，小試表達(dá)蛋白約為8mg/L,然后就上10L的發(fā)酵罐。正常來說，因為發(fā)酵罐菌密度比小試的能增加10倍，那就能得到8mg/L*10*10L=800mg的目的蛋白�？墒前l(fā)酵只得到了70mg！！ 酵母誘導(dǎo)的時候有一段營養(yǎng)真空期，可能會死一些菌，就會分泌一些蛋白酶，我這蛋白的結(jié)構(gòu)比較松散，現(xiàn)在就懷疑是發(fā)酵的時候被蛋白酶降解了，但是也不知道怎么確定！！然后確定了，我又該怎么辦呢？求蟲友幫忙啊 |
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lifuzhu3838
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 你不能根據(jù)小試和發(fā)酵罐的比較來確定你的蛋白真被降解了，因為兩個系統(tǒng)完全不同，發(fā)酵條件不同，對其蛋白表達(dá)必然有所影響。除非你發(fā)現(xiàn)蛋白量隨著發(fā)酵時間增加，然后又降低了。想提高表達(dá)量，個人覺得你可以優(yōu)化一下發(fā)酵條件，good luck！ |
3樓2013-08-03 21:11:04
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