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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 存檔舊帖 » 轉膜緩沖液的作用？
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[求助]
轉膜緩沖液的作用？
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可以說的具體一點嗎？越詳細越好。謝謝各位啦！ |
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cicelyzh
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| 給電場提供介質，與電泳的原理差不多，讓蛋白或者核酸在電場力的作用下從負極向正極泳動。轉膜緩沖液有多種配方，我不知道你特指哪種。如果是指做western的Tris-甘氨酸系統(tǒng)，tris-glycine用于維持一定pH的緩沖液，甲醇維持一定疏水性，并在一定程度上限制分子擴散。有些配方里面有SDS，主要是可以給蛋白增加負電性，提高蛋白在電場下的泳動速度。 |
2樓2013-08-02 22:24:40
Sthunder
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試劑 1.1 PBS緩沖液：137millimolar/L NaCl，2.7millimolar/L KCl，10millimolar/L Na2HPO4，2millimolar/L KH2PO4，pH為7.5。 1.2 1×轉移Buffer（4℃保存） 甘氨酸 14.4g Tris-base 3.03g 甲醇 200ml 加水定容至1000ml。 1.3 10×TBS： NaCl 45g Tris-base 60.6g 水 加到300ml 用濃HCl調pH至7.5，定容至500ml。 1.4 封閉液 1.5g脫脂奶粉加到30ml 1×TBS中。 1.5 T·TBS： 1000ml 1×TBS加入2ml Tween-20混勻。 1.6 抗體稀釋液： 10 ml T·TBS加入0.5g脫脂奶粉。 1.7 DAB顯色液（10ml）： DAB 6mg Tris（0.01M, pH7.6） 9ml NiCl2(0.3%，w/v) 1ml 30% H2O2 10μl |
3樓2013-08-02 22:26:09
4樓2013-08-02 22:38:17
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5樓2013-08-02 23:34:46
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