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[求助]
轉(zhuǎn)膜緩沖液的作用?
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可以說的具體一點嗎?越詳細越好。謝謝各位啦! |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
| 給電場提供介質(zhì),與電泳的原理差不多,讓蛋白或者核酸在電場力的作用下從負極向正極泳動。轉(zhuǎn)膜緩沖液有多種配方,我不知道你特指哪種。如果是指做western的Tris-甘氨酸系統(tǒng),tris-glycine用于維持一定pH的緩沖液,甲醇維持一定疏水性,并在一定程度上限制分子擴散。有些配方里面有SDS,主要是可以給蛋白增加負電性,提高蛋白在電場下的泳動速度。 |
木蟲 (正式寫手)
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試劑 1.1 PBS緩沖液:137millimolar/L NaCl,2.7millimolar/L KCl,10millimolar/L Na2HPO4,2millimolar/L KH2PO4,pH為7.5。 1.2 1×轉(zhuǎn)移Buffer(4℃保存) 甘氨酸 14.4g Tris-base 3.03g 甲醇 200ml 加水定容至1000ml。 1.3 10×TBS: NaCl 45g Tris-base 60.6g 水 加到300ml 用濃HCl調(diào)pH至7.5,定容至500ml。 1.4 封閉液 1.5g脫脂奶粉加到30ml 1×TBS中。 1.5 T·TBS: 1000ml 1×TBS加入2ml Tween-20混勻。 1.6 抗體稀釋液: 10 ml T·TBS加入0.5g脫脂奶粉。 1.7 DAB顯色液(10ml): DAB 6mg Tris(0.01M, pH7.6) 9ml NiCl2(0.3%,w/v) 1ml 30% H2O2 10μl |

木蟲 (正式寫手)

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