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[求助] 提取的基因組DNA 電泳圖異常

對(duì)近期提取的基因組DNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，發(fā)現(xiàn)膠圖異常，如下圖：
從左到右分別為Marker，gDNA-300ng、gDNA-500ng、gDNA-1000ng.DNA定量的結(jié)果都正常，不含有蛋白及RNA（260/280=1.78，260/230=2.3）大家?guī)兔Ψ治鱿拢娪驹趺磁艹蛇@樣了？分析過是不是電泳緩沖液出了問題，更換了電泳緩沖液也是跑成這樣，但應(yīng)該不是緩沖液的原因，因?yàn)榕芷渌麡悠�，條帶都正常。

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2013-08-07 17:44:29, 121.09 K

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1樓 2013-08-07 17:44:34

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gyesang: 回帖置頂 2013-08-08 16:36:07

正常。
建議改進(jìn)：
1、配0.6或0.8%的膠，注意凝膠的時(shí)候久一點(diǎn)。
2、上樣量減少！不用上1ug那么多，只需要上100-200ng甚至只需50ng即可。
3、低電壓 5V/cm電泳1-2小時(shí)。

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5樓2013-08-08 15:43:04

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可能樣品中含有較多的鹽。

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2樓2013-08-08 11:38:22

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54808455

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liuxiuaza: 金幣+2 2013-08-08 17:25:44

是什么的gDNA？沉淀時(shí)，是不是像膠狀物（粘粘的樣子）？如果是這種情況，應(yīng)該是含有較多的多糖。

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3樓2013-08-08 13:04:58

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wenzi6337

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gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2013-09-30 22:26:43

檢測基因組DNA可以用低濃度瓊脂糖膠，Marker也不是太清晰。

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4樓2013-08-08 15:05:36

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引用回帖:

5樓: Originally posted by longrna at 2013-08-08 15:43:04
正常。
建議改進(jìn)：
1、配0.6或0.8%的膠，注意凝膠的時(shí)候久一點(diǎn)。
2、上樣量減少！不用上1ug那么多，只需要上100-200ng甚至只需50ng即可。
3、低電壓 5V/cm電泳1-2小時(shí)。

可是之前上樣量那么大，跑出來的膠只有一條帶，很漂亮，現(xiàn)在跑成這樣，我懷疑是樣品或者跑膠的時(shí)候出現(xiàn)了問題。

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6樓2013-08-08 17:23:35

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2樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-08 11:38:22
可能樣品中含有較多的鹽。

應(yīng)該沒有那么多的鹽，因?yàn)槲矣胣anodrop定量結(jié)果，260/230為2.33，鹽離子正常啊

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7樓2013-08-08 17:24:35

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3樓: Originally posted by 54808455 at 2013-08-08 13:04:58
是什么的gDNA？沉淀時(shí)，是不是像膠狀物（粘粘的樣子）？如果是這種情況，應(yīng)該是含有較多的多糖。

是293T細(xì)胞的基因組DNA，乙醇沉淀再溶解時(shí)，是會(huì)有膠狀物，粘粘的，感覺老吹不開一樣，這個(gè)怎么除去��？

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8樓2013-08-08 17:25:40

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4樓: Originally posted by wenzi6337 at 2013-08-08 15:05:36
檢測基因組DNA可以用低濃度瓊脂糖膠，Marker也不是太清晰。

嗯，可能是拍照的時(shí)候，焦距沒有調(diào)好，結(jié)果不好，也懶得調(diào)了。

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9樓2013-08-08 17:26:33

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gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2013-09-30 22:26:53

引用回帖:

6樓: Originally posted by liuxiuaza at 2013-08-08 17:23:35
可是之前上樣量那么大，跑出來的膠只有一條帶，很漂亮，現(xiàn)在跑成這樣，我懷疑是樣品或者跑膠的時(shí)候出現(xiàn)了問題。...

有時(shí)候gDNA溶解不充分，而上樣量大的情況下就容易跑成這樣。
畢竟gDNA比較大，長又粘稠沒跑開的樣子就跑成那樣。如果要跑成一條帶那只能減少上樣量或使用大孔的膠。

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10樓2013-08-09 10:55:05

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