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shiliyusly新蟲 (小有名氣)
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[求助]
QPCR之數(shù)據(jù)處理
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大家好，我在做QPCR對于儀器自動設定的熒光閾值有點困惑，想請教下高手。 我用的是Stratagene mx3000p QPCR儀。 1 完全相同的東西，儀器2次做給的熒光閾值不同； 2 不同基因一起做，將2個基因全選中讀取數(shù)據(jù)時給的熒光閾值是相同的，但是如果單個基因分開選中熒光閾值不同。 我研究的是不同成熟度楊梅的特定基因的表達差異，必須保證同個基因的不同樣品熒光閾值相同，這樣可以分析該基因的表達差異。但是不能比較不同基因之間的表達差異，因為不同基因熒光閾值儀器設定的不同。是這樣嗎？ 如果我在上面的基礎，加上不同品種楊梅的比較，2個品種的楊梅5個成熟度A基因表達差異比較，儀器分2次做，一次一個品種，由于儀器設定的熒光閾值不同，是要先調(diào)成一致嗎？手調(diào)的話可能不是在閾值合適的位置，查資料是說要在3-15個循環(huán)偏差的10倍。 下面的圖是儀器上的閾值設置選項，好像不是所說的3-15個循環(huán)偏差的10倍，看不懂，麻煩高手指點��！感激不盡�。�！ psb.jpg IMG20130810171714.jpg [ Last edited by shiliyusly on 2013-8-10 at 22:14 ] |
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wolong1984
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3樓2013-09-29 10:52:30
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