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zzy_569金蟲 (小有名氣)
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[求助]
色譜柱使用DMSO的問題
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| 實驗室使用的是ultimate 3000 液相色譜儀,柱子用的是戴安的c18色譜柱,5um。樣品只溶于dmso,準備用dmso溶解樣品,乙腈稀釋進樣?梢詥?會損壞柱子嗎? |
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金蟲 (小有名氣)

金蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
金蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
| 建議樓主先用最少量的DMSO將樣品溶解,再用乙腈甲醇之類稀釋到所需要的濃度,這是可以的。因為你的進樣量一般會很少,20uL比如,用1mL的流速,其實對柱子的影響是很小的。在柱子非常臟時,可以進幾針DMSO,達到清洗柱子的目的。我們在做反向制備時,樣品不好溶解,也會用DMSO或DMF溶解樣品,發(fā)現(xiàn)對柱子的影響很小。用DMSO需要注意的是DMSO在低波段有吸收,比如214nm吸收很強,而且極性大,基本在死時間出峰,這點在做樣品時需要注意。希望我的回答對你有所幫助。 |

木蟲 (正式寫手)
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不建議用dmso乙腈溶液作流動相。DMSO在低波段有很強的吸收,而且極性大,對峰型會有影響。 DMSO的乙腈溶液我們的用來洗柱子的。 具體要根據(jù)樣品的性質來確定。 如果樣品很難溶,有可能在水/乙腈的體系會析出,導致柱壓很高。增加有機相的比例可能有改善。 有些樣品在酸性條件下溶解度會好一些,可以嘗試在流動相里加酸。 或者換正相柱,用正相方法走。 |
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