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zzy_569金蟲 (小有名氣)
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[求助]
色譜柱使用DMSO的問題
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| 實(shí)驗(yàn)室使用的是ultimate 3000 液相色譜儀，柱子用的是戴安的c18色譜柱，5um。樣品只溶于dmso，準(zhǔn)備用dmso溶解樣品，乙腈稀釋進(jìn)樣。可以嗎？會損壞柱子嗎？ |
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DMSO在低波長下有吸收的；也是強(qiáng)極性的溶劑，且有一定的氧化性，一般情況下是當(dāng)柱壓很高認(rèn)為柱子很臟時(shí)不得以才考慮的沖柱溶劑，前輩經(jīng)驗(yàn)多傳DMSO對C18柱是有損傷的。 C18柱用DMSO溶解樣品做測試，不是長久之計(jì)，一時(shí)權(quán)衡倒可考慮。 |
2樓2013-08-19 09:28:02
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| 建議樓主先用最少量的DMSO將樣品溶解，再用乙腈甲醇之類稀釋到所需要的濃度，這是可以的。因?yàn)槟愕倪M(jìn)樣量一般會很少，20uL比如，用1mL的流速，其實(shí)對柱子的影響是很小的。在柱子非常臟時(shí)，可以進(jìn)幾針DMSO，達(dá)到清洗柱子的目的。我們在做反向制備時(shí)，樣品不好溶解，也會用DMSO或DMF溶解樣品，發(fā)現(xiàn)對柱子的影響很小。用DMSO需要注意的是DMSO在低波段有吸收，比如214nm吸收很強(qiáng)，而且極性大，基本在死時(shí)間出峰，這點(diǎn)在做樣品時(shí)需要注意。希望我的回答對你有所幫助。 |
7樓2013-08-19 21:24:53
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不建議用dmso乙腈溶液作流動相。DMSO在低波段有很強(qiáng)的吸收，而且極性大，對峰型會有影響。 DMSO的乙腈溶液我們的用來洗柱子的。 具體要根據(jù)樣品的性質(zhì)來確定。 如果樣品很難溶，有可能在水/乙腈的體系會析出，導(dǎo)致柱壓很高。增加有機(jī)相的比例可能有改善。 有些樣品在酸性條件下溶解度會好一些，可以嘗試在流動相里加酸。 或者換正相柱，用正相方法走。 |
8樓2013-08-20 09:14:14
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