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紫眸玉兒木蟲 (小有名氣)
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[求助]
連接老連不上,求指導(dǎo)
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最近,本來挺簡單的連接老出問題,自己也試了很多次。 實驗?zāi)繕?biāo):將一個載體上啟動子替換成另外的啟動子,用的酶切位點是DraIII,擴增所需啟動子的引物上有該酶切位點,還加上保護堿基GGG,上游引物為5'GGGCACGGGGTGAGGGAACAAAAGCTGGGTAC3' ;下游為5'GGGCACTTTGTGAATCCATGCTAGAGTCCC3',擴增后酶切回收,再與相應(yīng)的載體連接;連接體系載體和產(chǎn)物的濃度都很高,之前也試過很多體系,都不行,求指導(dǎo)! |
銅蟲 (小有名氣)
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