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wujiwuhui鐵蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
剛開(kāi)始做實(shí)驗(yàn)，關(guān)于人總RNA的提取的若干問(wèn)題！ 已有2人參與
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關(guān)于人RNA提取的幾個(gè)很基礎(chǔ)的問(wèn)題，請(qǐng)大神們指點(diǎn)下， 1.已經(jīng)知道電泳結(jié)果是三條帶，5S,18S,28S，分別是120, 1874,4718個(gè)核苷酸組成，考慮到RNA是單鏈，就像網(wǎng)上說(shuō)的，“28S 和 18S 分別位于 2.0kb 和 0.9kb 左右”，對(duì)嗎？可從我的圖來(lái)看，似乎28S是位于4k的最亮的那條帶吧？這怎么解釋呢？28S 和 18S到底在多少k的位置呢？ 2.解釋一下，第一個(gè)圖是血液提取，第二個(gè)是組織提取的（效果不好），marker都是DNA的2k，第三個(gè)是網(wǎng)上別人提取的，我的問(wèn)題是，第一個(gè)圖看上去還可以（最亮的是28s吧？），可上面有兩個(gè)亮點(diǎn)不知道是什么？難道是氣泡？ 3.為什么人家的圖片點(diǎn)樣孔那么清晰，我的確那么不明顯呢？應(yīng)該怎么點(diǎn)？ 4.如果做RT的話(huà)對(duì)RNA完整性要求很高嗎？FFPE做RT成功的幾率有多大？沒(méi)做過(guò)，純請(qǐng)教。 灰常感謝！ Administrator 2013-09-10 15hr 57min.jpg Administrator 2013-09-12 15hr 13min.jpg 123.jpg |
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songwang0516
銀蟲(chóng) (初入文壇)
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137167741: 金幣+1, 小木蟲(chóng)交流，共同進(jìn)步~~ 2013-09-17 08:41:25
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
137167741: 金幣+1, 小木蟲(chóng)交流，共同進(jìn)步~~ 2013-09-17 08:41:25
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關(guān)于第一個(gè)問(wèn)題，我覺(jué)得4k處的應(yīng)該不是RNA，估計(jì)是DNA污染。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn)RNA的28S和18S兩條帶應(yīng)該在1K-2K之間。 第二個(gè)問(wèn)題我覺(jué)得你的第二個(gè)圖比第一個(gè)圖要好。 膠孔的原因可能與配膠有關(guān)系，我建議你盡量用大孔膠，這樣上圖也好看。 |
2樓2013-09-16 10:00:28
laojiu9878
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3樓2013-09-16 13:08:45
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