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KEVIN_LOVE木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
藍(lán)白斑篩選的有關(guān)問(wèn)題 已有1人參與
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| 如果插入的目標(biāo)基因較小,僅使用藍(lán)白斑篩選合適嗎?對(duì)于白色菌落還需要做哪些進(jìn)一步的鑒定? |
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)

| 藍(lán)白斑篩選沒(méi)有意義啊。假陽(yáng)性假陰性都很厲害,而且平板還要涂IPTG和X-gal預(yù)處理半小時(shí)。覺(jué)得藍(lán)白斑和抗性篩選效果差不多,反正我們這邊是直接涂布然后12h后挑單克隆溶于50ul滅菌水里,取2ul做模板PCR檢測(cè),剩下的接種30ul到EP管中,最后剩下的10ul不到留著后續(xù)特異性引物檢測(cè)。我覺(jué)得PCR檢測(cè)是最好的,先用通用引物檢測(cè),陽(yáng)性的結(jié)果,再用自己設(shè)計(jì)的特異性引物 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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