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KEVIN_LOVE木蟲 (正式寫手)
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[求助]
藍(lán)白斑篩選的有關(guān)問(wèn)題 已有1人參與
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| 如果插入的目標(biāo)基因較小，僅使用藍(lán)白斑篩選合適嗎？對(duì)于白色菌落還需要做哪些進(jìn)一步的鑒定？ |
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wqertyre
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
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2樓2013-10-06 10:16:02
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-10-06 14:22:07
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-10-06 14:22:07
| 藍(lán)白斑篩選沒(méi)有意義啊。假陽(yáng)性假陰性都很厲害，而且平板還要涂IPTG和X-gal預(yù)處理半小時(shí)。覺(jué)得藍(lán)白斑和抗性篩選效果差不多，反正我們這邊是直接涂布然后12h后挑單克隆溶于50ul滅菌水里，取2ul做模板PCR檢測(cè)，剩下的接種30ul到EP管中，最后剩下的10ul不到留著后續(xù)特異性引物檢測(cè)。我覺(jué)得PCR檢測(cè)是最好的，先用通用引物檢測(cè)，陽(yáng)性的結(jié)果，再用自己設(shè)計(jì)的特異性引物 |
3樓2013-10-06 13:52:15
kentgrey
新蟲 (初入文壇)
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4樓2014-02-07 16:00:49
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