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考馬斯亮藍(lán)法測蛋白質(zhì)，麻煩進(jìn)來看一下吧
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做過考馬斯亮藍(lán)的各位大蟲，幫我看看我哪里出錯了吧。我連續(xù)過了兩天多，標(biāo)準(zhǔn)曲線總是做不出來。 考馬斯亮藍(lán)溶液配制：考馬斯亮藍(lán)G―250 50mg溶于25mL 95%乙醇中，加入50mL 85%磷酸，用蒸餾水稀釋至500mL。然后用0.45um濾膜過濾使用。溶液配好后還有一個問題，考馬斯亮藍(lán)加入乙醇磷酸后邊磚紅色，但是一旦加入水就變成藍(lán)色了，這樣的考馬斯亮藍(lán)溶液可以用嗎？ 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：25mg牛血清白蛋白+250ml蒸餾水 定容，母液濃度為0.1mg/ml。 檢測：分別取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml蛋白質(zhì)溶液，分別加去離子水至1ml，然后加考馬斯亮藍(lán)各5ml。 結(jié)果：吸光度測了N遍，但結(jié)果大體都是1號到6號：0.622 0.654 0.719 0.609 0.546 0.729 （只選取一次檢測結(jié)果） 我都郁悶了 不知道問題出在哪里。。。各位大神幫忙看看到底是哪里出了錯吧�。�！謝謝看完！有點(diǎn)長！ |
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4樓2013-11-12 10:07:39
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