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考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白質(zhì)，麻煩進(jìn)來(lái)看一下吧
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做過(guò)考馬斯亮藍(lán)的各位大蟲(chóng)，幫我看看我哪里出錯(cuò)了吧。我連續(xù)過(guò)了兩天多，標(biāo)準(zhǔn)曲線總是做不出來(lái)。 考馬斯亮藍(lán)溶液配制：考馬斯亮藍(lán)G―250 50mg溶于25mL 95%乙醇中，加入50mL 85%磷酸，用蒸餾水稀釋至500mL。然后用0.45um濾膜過(guò)濾使用。溶液配好后還有一個(gè)問(wèn)題，考馬斯亮藍(lán)加入乙醇磷酸后邊磚紅色，但是一旦加入水就變成藍(lán)色了，這樣的考馬斯亮藍(lán)溶液可以用嗎？ 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：25mg牛血清白蛋白+250ml蒸餾水 定容，母液濃度為0.1mg/ml。 檢測(cè)：分別取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml蛋白質(zhì)溶液，分別加去離子水至1ml，然后加考馬斯亮藍(lán)各5ml。 結(jié)果：吸光度測(cè)了N遍，但結(jié)果大體都是1號(hào)到6號(hào)：0.622 0.654 0.719 0.609 0.546 0.729 （只選取一次檢測(cè)結(jié)果） 我都郁悶了 不知道問(wèn)題出在哪里。。。各位大神幫忙看看到底是哪里出了錯(cuò)吧�。�！謝謝看完！有點(diǎn)長(zhǎng)！ |
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addison7805
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3樓2013-11-11 22:07:37
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