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微生物此生代謝產(chǎn)物研究相關(guān)問題
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問題一,微生物此生代謝產(chǎn)物的研究中,為什么很多文獻(xiàn)中只用了乙酸乙酯的萃取物,而不像植物中的天然產(chǎn)物那樣分階萃取呢? 問題二,對于初期次生代謝產(chǎn)物的種類的研究,在不同培養(yǎng)基中,同一菌株的代謝產(chǎn)物不同,種類、數(shù)量均有變化,怎么來斷定代謝產(chǎn)物大約的種類數(shù)目?HPLC+TLC嗎?TLC是用什么儀器檢測的? 問題三,研究中,有很多菌株可以選擇,在選擇研究的菌株時,是以此生代謝產(chǎn)物的的種類作為參考還是以代謝產(chǎn)物的活性作為參考?or活性作引導(dǎo),種類作主要參考?如果是這樣,求大神分享一下經(jīng)驗(yàn),即實(shí)戰(zhàn)時,是如何參考的,謝謝! 小弟一人作這個研究,學(xué)校有史以來頭一個,無從下手,求指導(dǎo),跪謝! |
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1、由于乙酸乙酯本身的易揮發(fā)性等特點(diǎn),所以作萃取劑比較合適;更重要的是它萃取的是中低極性的物質(zhì)部分,這部分前人研究的比較多,容易出成績,所以很多人都做這個,當(dāng)然也有人用二氯甲烷及高極性部分的正丁醇萃取。 2、如果想大致了解下某個菌的代謝物質(zhì),可以拿發(fā)酵液粗提物上個GC-ms,用ms的質(zhì)譜庫可以匹配一些常見的物質(zhì),如脂肪酸等; 3、這個應(yīng)該根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)?zāi)康膩戆,如果是想要做藥做物質(zhì)的,可做活性先,如果是做發(fā)酵什么的,可以從菌著手。當(dāng)然還可以通過宏基因篩選法篩選含目的基因(如某種抗生素)的菌株。 |

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1.我覺得單用乙酸乙酯萃取,萃取不完,在水相中還有蠻多物質(zhì)的,所以就想用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分階段萃取,有必要嗎?在分階段萃取的時候,用氯仿萃取3或5次,再用乙酸乙酯萃取,問題出現(xiàn)了。首先是在乙酸乙酯層仍舊含有氯仿層的物質(zhì),那如何保證氯仿萃取的時候物質(zhì)都萃取完全了呢?如果氯仿層萃取的時候物質(zhì)有殘留,那過柱的時候,工作量就無形中增加了。這個問題有很好的解決辦法嗎?或者說有什么比較簡潔的辦法可以判斷氯仿層已經(jīng)萃取干凈了?其次,用氯仿萃取完成后,再加入乙酸乙酯萃取,出現(xiàn)了很嚴(yán)重的乳化現(xiàn)象,是為什么呢?有什么解決辦法么? 2.關(guān)于GC-MS,適用于所有物質(zhì)嗎?如果物質(zhì)不容易氣化可以做嗎呢?沒做過氣相,目前知識面僅限于書本知識,望見諒~~我同學(xué)說他們學(xué)校用液質(zhì)聯(lián)用,我們學(xué)校只有氣質(zhì)~~~ 3.我們是朝著做藥去的,就是為了得到新化合物,當(dāng)然有活性才好~ |

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