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微生物此生代謝產(chǎn)物研究相關(guān)問題
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問題一，微生物此生代謝產(chǎn)物的研究中，為什么很多文獻(xiàn)中只用了乙酸乙酯的萃取物，而不像植物中的天然產(chǎn)物那樣分階萃取呢？ 問題二，對(duì)于初期次生代謝產(chǎn)物的種類的研究，在不同培養(yǎng)基中，同一菌株的代謝產(chǎn)物不同，種類、數(shù)量均有變化，怎么來斷定代謝產(chǎn)物大約的種類數(shù)目？HPLC+TLC嗎？TLC是用什么儀器檢測的？ 問題三，研究中，有很多菌株可以選擇，在選擇研究的菌株時(shí)，是以此生代謝產(chǎn)物的的種類作為參考還是以代謝產(chǎn)物的活性作為參考？or活性作引導(dǎo)，種類作主要參考？如果是這樣，求大神分享一下經(jīng)驗(yàn)，即實(shí)戰(zhàn)時(shí)，是如何參考的，謝謝！ 小弟一人作這個(gè)研究，學(xué)校有史以來頭一個(gè)，無從下手，求指導(dǎo)，跪謝��！ |
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1.我覺得單用乙酸乙酯萃取，萃取不完，在水相中還有蠻多物質(zhì)的，所以就想用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分階段萃取，有必要嗎？在分階段萃取的時(shí)候，用氯仿萃取3或5次，再用乙酸乙酯萃取，問題出現(xiàn)了。首先是在乙酸乙酯層仍舊含有氯仿層的物質(zhì)，那如何保證氯仿萃取的時(shí)候物質(zhì)都萃取完全了呢？如果氯仿層萃取的時(shí)候物質(zhì)有殘留，那過柱的時(shí)候，工作量就無形中增加了。這個(gè)問題有很好的解決辦法嗎？或者說有什么比較簡潔的辦法可以判斷氯仿層已經(jīng)萃取干凈了？其次，用氯仿萃取完成后，再加入乙酸乙酯萃取，出現(xiàn)了很嚴(yán)重的乳化現(xiàn)象，是為什么呢？有什么解決辦法么？ 2.關(guān)于GC-MS，適用于所有物質(zhì)嗎？如果物質(zhì)不容易氣化可以做嗎呢？沒做過氣相，目前知識(shí)面僅限于書本知識(shí)，望見諒~~我同學(xué)說他們學(xué)校用液質(zhì)聯(lián)用，我們學(xué)校只有氣質(zhì)~~~ 3.我們是朝著做藥去的，就是為了得到新化合物，當(dāng)然有活性才好~ |
3樓2013-11-05 16:16:47
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1, 謝謝交流 2013-11-05 17:52:06
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1, 謝謝交流 2013-11-05 17:52:06
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1、由于乙酸乙酯本身的易揮發(fā)性等特點(diǎn)，所以作萃取劑比較合適；更重要的是它萃取的是中低極性的物質(zhì)部分，這部分前人研究的比較多，容易出成績，所以很多人都做這個(gè)，當(dāng)然也有人用二氯甲烷及高極性部分的正丁醇萃取。 2、如果想大致了解下某個(gè)菌的代謝物質(zhì)，可以拿發(fā)酵液粗提物上個(gè)GC-ms,用ms的質(zhì)譜庫可以匹配一些常見的物質(zhì)，如脂肪酸等； 3、這個(gè)應(yīng)該根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)?zāi)康膩戆�，如果是想要做藥做物質(zhì)的，可做活性先，如果是做發(fā)酵什么的，可以從菌著手。當(dāng)然還可以通過宏基因篩選法篩選含目的基因（如某種抗生素）的菌株。 |
2樓2013-11-05 12:25:37
4樓2013-11-07 18:45:48
5樓2013-11-08 09:59:19
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