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[交流]
表達(dá)載體和目的片段鏈接問(wèn)題 已有3人參與
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載體是用的puc18目的片段式未知的（細(xì)菌基因組經(jīng)sau3AI酶切的）要求片段大小是4-10kb的，鏈接是4度48H 鏈接體系是10ul T4ligase 5xbuffer 鏈接后電轉(zhuǎn)用的感受態(tài)是大腸桿菌knabc一個(gè)耐鹽缺陷株，電轉(zhuǎn)電壓時(shí)2500v 時(shí)間是4-5ms,但是板上就是沒(méi)有陽(yáng)性菌落，求給點(diǎn)建議，做了3個(gè)月了還沒(méi)有進(jìn)展 |
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不葉玨
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