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dirkyoung金蟲 (正式寫手)
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[求助]
western的轉膜液配方
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最近做大蛋白western遇到一點點問題，于是在網(wǎng)上發(fā)現(xiàn)了兩種轉膜液配方。 配方一：Tris 5.8g，甘氨酸 2.9g，SDS 0.376g 配方二：Tris 3.05g，甘氨酸 14.4g 甲醇都是200ml，然后1L定容。 方案二是我們實驗室一直在用的，當然會加極少量的SDS，對于100kd一下的蛋白沒有問題，200kd以下的勉強能行，200kd以上的之前沒人做過，我做了不行。那么這兩個配方里甘氨酸為什么差別會這么大呢？或者說這兩種方案各有什么適用范圍？ 另外我還看到說調整甲醇和SDS的含量對于大蛋白的電轉有幫助，不知是否如此。 |
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7樓2014-03-08 11:03:43
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