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dirkyoung金蟲 (正式寫手)
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[求助]
western的轉(zhuǎn)膜液配方
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最近做大蛋白western遇到一點(diǎn)點(diǎn)問題,于是在網(wǎng)上發(fā)現(xiàn)了兩種轉(zhuǎn)膜液配方。 配方一:Tris 5.8g,甘氨酸 2.9g,SDS 0.376g 配方二:Tris 3.05g,甘氨酸 14.4g 甲醇都是200ml,然后1L定容。 方案二是我們實(shí)驗(yàn)室一直在用的,當(dāng)然會加極少量的SDS,對于100kd一下的蛋白沒有問題,200kd以下的勉強(qiáng)能行,200kd以上的之前沒人做過,我做了不行。那么這兩個配方里甘氨酸為什么差別會這么大呢?或者說這兩種方案各有什么適用范圍? 另外我還看到說調(diào)整甲醇和SDS的含量對于大蛋白的電轉(zhuǎn)有幫助,不知是否如此。 |
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