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22樓2013-12-10 20:34:18
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2樓2013-12-09 22:43:51
【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流！ 2013-12-09 23:37:00
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假陽(yáng)性太多了，可能是載體自連了，所以菌液PCR 什么都沒(méi)有，很難挑到真陽(yáng)性。你用什么酶切的，在做連接體系的時(shí)候，按1.6%加內(nèi)切酶在連接反應(yīng)體系里，連接反應(yīng)完成后，在37度中讓內(nèi)切酶反應(yīng)半小時(shí)，把自連的載體切開(kāi)，這樣就減少了自連的假陽(yáng)性。后面在做就能簡(jiǎn)單點(diǎn)，我也和你一樣，現(xiàn)在假陽(yáng)性是解決了菌液PCR 陽(yáng)性也很正常，但提了質(zhì)粒又不對(duì) [ 發(fā)自小木蟲(chóng)客戶端 ] |
3樓2013-12-09 22:52:47
4樓2013-12-09 22:54:30
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5樓2013-12-09 23:37:46
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