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wangmiao1112鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白電泳沒帶 已有4人參與
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最近做蛋白電泳，做了三次都沒帶，大家給分析分析。我是想自己純化一下實(shí)驗(yàn)室買的粗酶粉。 1、取粗酶粉充分溶解后，10000rpm離心20分鐘，棄下層沉淀。 2、取上清液加硫酸銨鹽析，取一定體積緩沖液將下層沉淀蛋白溶解 3、脫鹽柱脫鹽處理。 4、測蛋白濃度4.5mg/ml 然后取20ul 加5ul上揚(yáng)緩沖液，煮沸5分鐘。跑sds-page，marker跑的很好，可是蛋白條帶沒有。自己做了兩次，讓別人帶了一次都沒有條帶。請大家給分析分析問題出現(xiàn)在哪了 |
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2樓2013-12-22 21:22:14
cicelyzh
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你是否把酶粉充分溶解了？商品化的酶粉應(yīng)該沒有問題。你可以試試直接跑一下粗酶粉，是否有條帶。你純化的各個(gè)步驟要記錄回收率，保存各個(gè)組分，便于分析問題出在哪里。 |
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wangmiao11126樓2013-12-23 23:01:38
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9樓2014-01-30 21:33:05
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