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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 鏈霉菌基因組DNA的大提
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鏈霉菌基因組DNA的大提
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我有幾株鏈霉菌想要提取基因組DNA后做雜交，大提DNA的方法是改良的CTAB法，最后雖然提取的量比較少，但是能用玻璃棒攪絲，之后用70%的乙醇洗鹽，再之后風干（風干徹底），再之后用0.1xSSC溶解，卻溶解不了，SSC是最新配制的，而且第一次提取的時候出現(xiàn)不溶解的情況，又重新配制了ssc···第二次還是不溶解。求大神指導。 或者哪位大神之前大提過鏈霉菌的DNA，求方法啊，我已經提了一個多月了，真心已經黔驢技窮了··· |
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taoway
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【答案】應助回帖
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dgm1208: 金幣+70, ★★★★★最佳答案, 謝謝你哈，之前由于操作失誤把之前的100金幣都給了bikexmx，又追加的，金幣不多，謝謝你 2013-12-26 18:19:04
dgm1208: 金幣+70, ★★★★★最佳答案, 謝謝你哈，之前由于操作失誤把之前的100金幣都給了bikexmx，又追加的，金幣不多，謝謝你 2013-12-26 18:19:04
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不好意思，剛才在路上用手機回復的，發(fā)現(xiàn)全是亂碼。 我感覺你的問題出在DNA風干，我們實驗室提取鏈霉菌總DNA后，用75%乙醇脫鹽兩次，然后稍稍spin一下用移液槍吸掉液體，敞口在超凈臺或工作臺面放置幾分鐘至聞不到乙醇味道，隨后加水或TE溶解DNA。混勻一下在55度水浴鍋內放置5-10分鐘促溶一下就可以了。注意一定不要將總DNA完全風干！祝好運！ |
4樓2013-12-23 22:36:06
【答案】應助回帖
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感謝參與，應助指數(shù) +1
laozuzunzhe: 金幣+4, good！ 2013-12-23 21:38:05
dgm1208: 金幣+30, ★★★很有幫助, 謝謝你哈，之前由于操作失誤把之前的100金幣都給了bikexmx，又追加的，金幣不多，謝謝你 2013-12-26 18:19:51
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laozuzunzhe: 金幣+4, good！ 2013-12-23 21:38:05
dgm1208: 金幣+30, ★★★很有幫助, 謝謝你哈，之前由于操作失誤把之前的100金幣都給了bikexmx，又追加的，金幣不多，謝謝你 2013-12-26 18:19:51
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方法一：如果這種菌能長成菌落 ，你就用寶生物的這個試劑盒來提一下（Lysis Buffer for Microorganism to Direct PCR），這個很便宜。 方法二：如果這個試劑盒不可以的話，你就用德國QIAGEN的試劑盒，這個大約1500，有點貴。 這些應該沒有問題，你試試吧。 希望能幫到你 |
2樓2013-12-23 21:13:54
taoway
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3樓2013-12-23 22:04:00
5樓2013-12-24 08:48:25
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