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GracePoppy新蟲 (初入文壇)
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Bradford法定量蛋白質(zhì) 已有2人參與
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| 請問大家，誰經(jīng)常用Bradford法定量蛋白呀，我定了幾次蛋白，標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2老是達不到三個9，每次只能達到1個9，請各位給我提供下用此方法定量的詳細步驟吧，越詳細越好，如從試劑配制開始。要是有完整的protocal的話，就更好了。還有決定實驗成敗的注意事項有哪些呢，謝謝。 |
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GracePoppy
新蟲 (初入文壇)
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3樓2014-01-05 23:29:26
fuyuandj86
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+3, 鼓勵交流！ 2014-01-04 00:28:40
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盡量按照說明書在規(guī)定的線性范圍內(nèi)做標(biāo)準(zhǔn)曲線, 和Bradford的染料反應(yīng)后要統(tǒng)一等5分鐘,等顏色穩(wěn)定下來再測,但是不要等的時間太長 不過話又說回來, 標(biāo)準(zhǔn)曲線R2達不到3個9又不礙事,我Bradford標(biāo)準(zhǔn)曲線從來都到不了那么好的線性 這個Bradford定量濃度本來就有誤差, 他的顯色機制和你氨基酸的組成有關(guān),如果你的蛋白里Arg,Trp,Phe,Pro比較多,那他顏色就會顯得更深. 結(jié)果就是你用不同的蛋白做標(biāo)準(zhǔn)曲線都會有差別, 標(biāo)準(zhǔn)曲線搞那么精細完全沒必要,湊合能用就行了 |
2樓2014-01-03 23:17:31
1769935
新蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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大神，請問考馬斯亮藍G250能測尿液里的總蛋白嗎？想用考馬斯亮藍G250測尿液里的蛋白濃度，然后乘以尿量，得出尿液里一共多少蛋白。這個辦法可行嗎？請大神指點謝謝大神 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2017-04-24 11:17:51
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