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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 化學化工區(qū) » 分析 » 色譜質譜 » 拖尾因子達不到要求
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[求助]
拖尾因子達不到要求 已有3人參與
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我在建立測定核酸的色譜條件，結果拖尾因子只有0.5左右，我嘗試了加三乙胺，調節(jié)流動相比例，最終還換了柱子，結果如下： 我要繼續(xù)哪方面的調試呢？ |
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2014-02-24 14:23:24, 29.5 K
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Pharma_soup
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【答案】應助回帖
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感謝參與，應助指數(shù) +1
516tt: 金幣+20, ★有幫助, 謝謝 2014-03-03 10:17:01
感謝參與，應助指數(shù) +1
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個人建議考慮以下三方面： 1.加入磷酸鹽且調節(jié)PH值，加三乙胺和酸都應該都不好使的，磷酸鹽體系能夠加強保留，加的量保證磷酸鹽在10~30mM； 2. 調節(jié)PH在2.5~7.6之間，因為核酸有等電點，等電點下一定可以得到比較單一的峰； 3.洗脫時如果有機相是甲醇，可以換成乙腈， 4.樣品應該考慮用酸溶解以增加溶解性； 5.開始摸方法的時候盡量使供試品的濃度比較低，這樣容易發(fā)現(xiàn)什么色譜條件最敏感，另外考慮一下樣品的穩(wěn)定性，試驗過程中看峰純度可以知道樣品的純度如何，峰的純度如何。 |
4樓2014-02-25 13:24:06
wuhaibobo
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3樓2014-02-24 21:22:11
5樓2014-03-03 10:18:18
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