lanlvmaomao

正規(guī)做RNA電泳應該使用MOPS緩沖液（含甲醛），而且所有的器具需用DEPC水處理，以防RNA降解，MOPS不貴，如果需要可參照分子克隆實驗指南自己配制。如果RNA電泳只是觀察RNA是否完整，以后實驗需要，用普通跑膠也能出來，就是用TBE了，我們也做過，沒問題，注意器具一般清潔，跑膠時間不要太長，可以的，用1.5%的膠。

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9樓2014-02-28 09:13:23

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tangqing小木

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10樓: Originally posted by lanlvmaomao at 2014-02-28 09:19:22
是的，我只是想看看RNA是否完整，那您說我還需要點maker么，需要的話，是把買的maker直接加到點樣孔么，非常感謝啦...

MARKER是不需要的

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11樓2014-02-28 09:29:09

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yyshpy007

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gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！ 2014-02-27 11:00:16

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2樓2014-02-27 02:38:54

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gyesang

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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵交流 2014-02-28 22:02:53

正如樓上所說，的確是跟跑DNA是一樣的，配1.5%左右的膠，用1X TAE跑就可以了

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3樓2014-02-27 11:00:10

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atlanticwi

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lanlvmaomao(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵交流 2014-02-28 22:02:24

....
最標準的是用甲醛變性電泳，如果嫌麻煩，就用普通TAE/TBE瓊脂糖電泳就成了，主要注意清洗好槽子、梳子制膠盒等，一般是拿高濃度NaOH來泡，DEPC水沖

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Let God do with it as He wills

4樓2014-02-27 13:02:10

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tangqing小木

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lanlvmaomao(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵交流 2014-02-28 22:02:01

實驗步驟：
(1)用1×TAE電泳緩沖液制作瓊脂糖凝膠，加1×TAE電泳緩沖液至液面覆蓋凝膠。
(2)在超凈工作臺上，用移液器吸取總RNA樣品4μl于封口膜上。在實驗臺上再加入5μl 1×TAE電泳緩沖液及1μl 的10X載樣緩沖液，混勻后，小心加入點樣孔。
(3)打開電源開關，調(diào)節(jié)電壓至100V，使RNA由負極向正極電泳，約30min后將凝膠放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射檢測儀上觀察RNA電泳結(jié)果。
試劑：
(1)MOPS緩沖液(10*):0.4mol/L 嗎啉代丙烷磺酸(MOPS) (Ph7.0)，0.1mol/L NaAc, 10mol/L EDTA。
(2)上樣染料：50%甘油，1mmol/L EDTA ,0.4%溴酚藍，0.4%二甲苯藍。
(3)甲醛。
(4)去離子甲酰胺。v電泳槽清洗：去污劑洗干凈(一般浸泡過夜)——水沖洗——乙醇干燥——3%H2O2灌滿——室溫放置10分鐘——0.1%DEPC水沖洗。

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7樓2014-02-27 16:14:09

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引用回帖:

7樓: Originally posted by tangqing小木 at 2014-02-27 16:14:09
實驗步驟：
(1)用1×TAE電泳緩沖液制作瓊脂糖凝膠，加1×TAE電泳緩沖液至液面覆蓋凝膠。
(2)在超凈工作臺上，用移液器吸取總RNA樣品4μl于封口膜上。在實驗臺上再加入5μl 1×TAE電泳緩沖液及1μl 的10X載樣 ...

非常感謝，我想用TEB也沒什么關系吧

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8樓2014-02-27 21:41:55

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9樓: Originally posted by tangqing小木 at 2014-02-28 09:13:23
正規(guī)做RNA電泳應該使用MOPS緩沖液（含甲醛），而且所有的器具需用DEPC水處理，以防RNA降解，MOPS不貴，如果需要可參照分子克隆實驗指南自己配制。如果RNA電泳只是觀察RNA是否完整，以后實驗需要，用普通跑膠也能出 ...

是的，我只是想看看RNA是否完整，那您說我還需要點maker么，需要的話，是把買的maker直接加到點樣孔么，非常感謝啦

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10樓2014-02-28 09:19:22

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