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wxl.1989822金蟲 (小有名氣)
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[求助]
重組質(zhì)粒雙酶切后沒有條帶 已有2人參與
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| RT 本人最近做的一個(gè)載體構(gòu)建，重組質(zhì)粒驗(yàn)證的時(shí)候提取質(zhì)粒雙酶切，空質(zhì)粒和酶切的一起跑膠顯示重組質(zhì)粒大致正確，酶切的泳道沒有條帶，進(jìn)行菌液和重組質(zhì)粒PCR目的基因顯示，能P出目的基因？請教這是怎么回事？ |
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| 這也是經(jīng)常遇到的問題，重組質(zhì)粒大小正確，進(jìn)行PCR驗(yàn)證也有出現(xiàn)目的條帶，但是就是酶切不出條帶，建議你測一下重組質(zhì)粒的濃度，然后按最終反應(yīng)體系質(zhì)粒的濃度約為20ug/uL進(jìn)行計(jì)算所需加樣的量，試試看吧，一般這樣是可以切出來的，37℃ 2.5h |
6樓2014-03-06 21:42:46
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