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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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windleakey

金蟲 (小有名氣)

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[求助] PCR產(chǎn)物連T載體轉(zhuǎn)化后，陽(yáng)性率低已有3人參與

RT，最近實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PCR產(chǎn)物經(jīng)純化后連T載體，轉(zhuǎn)化后陽(yáng)性率總是很低，挑10個(gè)單克隆做PCR可能只有一個(gè)是陽(yáng)性的，雖然能得到想要的，但還是覺(jué)得很奇怪，不知道是什么原因。
請(qǐng)問(wèn)有大神知道嗎？

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1樓 2014-03-22 22:50:19

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西門吹雪170

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引用回帖:

7樓: Originally posted by windleakey at 2014-03-23 14:33:03
轉(zhuǎn)化應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題。主要還是連接的問(wèn)題，是不是T載體什么問(wèn)題，有些問(wèn)題沒(méi)有注意讓T載體自連了...

可能性很大，所以要優(yōu)化一下體系

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8樓2014-03-23 17:11:47

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Lau_Kimura

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藍(lán)白斑篩選了沒(méi)？

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2樓2014-03-22 23:27:47

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wangguosing

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西門吹雪170: 應(yīng)助指數(shù)-1, 沒(méi)有幫助樓主解答問(wèn)題，不能獲得應(yīng)助指數(shù) 2014-03-23 10:03:37

我也是，咋辦，我的是氨氧化古菌的，怎么辦

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3樓2014-03-23 09:22:24

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西門吹雪170

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【答案】應(yīng)助回帖

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gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-03-31 19:57:53

轉(zhuǎn)化效率很低，可以換種轉(zhuǎn)化效率高的感受態(tài)細(xì)胞試試；也有肯能連接效率太低，建議變化一下體系的量，延長(zhǎng)連接時(shí)間

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4樓2014-03-23 10:05:02

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