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小小魚淚了新蟲 (初入文壇)
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[求助]
測(cè)蘋果CAT酶活性 已有1人參與
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今天測(cè)CAT酶活性,使用0.1M PH7.5的磷酸緩沖液,提取液是用77mgDTT和5%pvpp混合定容至100ml.最后測(cè)定使用20mmol的過(guò)氧化氫溶液加上100微升酶提取液。吸光值一直不變。。。。。保持一個(gè)值為什么?????是什么原因啊???!!求大神解答 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |

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專家經(jīng)驗(yàn): +383 |
新蟲 (初入文壇)
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專家經(jīng)驗(yàn): +383 |
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我仔細(xì)看了你的反應(yīng)體系,lz應(yīng)該再確定下反應(yīng)體系中各成分的含量 1、DTT,會(huì)還原酶的二硫鍵,此處可以不加 2、過(guò)氧化氫濃度,生化實(shí)驗(yàn)書上的反應(yīng)體系是3ml 15mM過(guò)氧化氫 + 0.1 ml酶液,你加20mmol過(guò)氧化氫太多太多了 3、提取的酶的濃度是否合適,提取過(guò)程是否使酶失活 lz問為什么說(shuō)是測(cè)定的過(guò)氧化氫殘余量,看來(lái)lz還沒有搞清楚實(shí)驗(yàn)原理。 |
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