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樊樊

銅蟲 (小有名氣)

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[求助] 各位大神，求助：PCR產(chǎn)物純化后沒(méi)有條帶了…… 已有3人參與

目的DNApcr擴(kuò)增出來(lái)?xiàng)l帶在1500bp左右，條帶明亮單一，符合我的實(shí)驗(yàn)要求。p了50微升體系，把產(chǎn)物用全式金純化試劑盒純化之后就沒(méi)有條帶了，這是怎么回事啊？第一次失敗懷疑是體系濃度太小，所以第二次p了兩管平行，同時(shí)p的，條帶都很正常，純化依舊沒(méi)有條帶，這是為什么。
各位大神幫幫我。

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1樓 2014-04-05 10:32:47

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樊樊

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引用回帖:

4樓: Originally posted by d00614028 at 2014-04-05 11:16:12
從兩個(gè)方面考慮吧：
1. 掛柱沒(méi)掛上。
2. 洗脫沒(méi)洗下。
洗脫的話看看洗脫液的PH值是否正確，看看說(shuō)明書。
實(shí)在不行自己配置試劑來(lái)純化把，3M CH3COONa，你在網(wǎng)上搜搜方法。

第一次求助，以為金幣是由自己給呢，一不小心全給前面的了，對(duì)不住啊
謝謝你的幫助，我今天再試試

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9樓2014-04-05 14:56:41

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kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2014-04-05 11:04:57
樊樊: 金幣+3, ★有幫助 2014-04-05 12:34:08

應(yīng)該是濃度低你可以濃縮下或者下次洗的時(shí)候少加點(diǎn)水洗

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相信什么才會(huì)得到什么

2樓2014-04-05 10:43:30

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西門吹雪170

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2014-04-05 11:05:02
樊樊: 金幣+2, ★★★很有幫助 2014-04-05 12:34:30

1、可能你過(guò)柱子的時(shí)候沒(méi)把水加到正中間
2、你檢測(cè)時(shí)的上樣量太小，本來(lái)回收后濃度就很低的

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3樓2014-04-05 10:57:03

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d00614028

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4樓2014-04-05 11:16:12

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