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zzl2516金蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR后電泳問題 已有5人參與
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| 最近一次PCR出現(xiàn)了令人費(fèi)解的問題，PCR之后的產(chǎn)物跑電泳跑了兩次都是沒有條帶，但是marker很清晰，但是產(chǎn)物用nanodrop測定結(jié)果顯示濃度是600多ng/μL，而且純度還挺高。。。。有人遇到過這種情況么。。。這樣的情況是P出來還是沒P出來啊。。。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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zzl2516(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-04-07 18:08:42
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zzl2516(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-04-07 18:08:42
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概念太不清楚了 PCR產(chǎn)物，不純化，直接測濃度有什么意義？ 或者說，如果你測過沒有開始P的和P完之后的，如果濃度降低，哈哈，那有可能出產(chǎn)物了。 用光吸收的方法測濃度，根本分不清楚dNTP，或者free-primer，還是你PCR得到的primer dimer， nonspecific bands或者你的產(chǎn)物。 而且，原理上說，dNTP的光吸收最高，這個(gè)封閉系統(tǒng)如果P出東西來了，光吸收還應(yīng)該下降。 |
5樓2014-04-07 15:12:57
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