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zzl2516金蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR后電泳問題 已有5人參與
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| 最近一次PCR出現(xiàn)了令人費解的問題,PCR之后的產(chǎn)物跑電泳跑了兩次都是沒有條帶,但是marker很清晰,但是產(chǎn)物用nanodrop測定結(jié)果顯示濃度是600多ng/μL,而且純度還挺高。。。。有人遇到過這種情況么。。。這樣的情況是P出來還是沒P出來啊。。。 |
專家顧問 (正式寫手)
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專家經(jīng)驗: +220 |
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概念太不清楚了 PCR產(chǎn)物,不純化,直接測濃度有什么意義? 或者說,如果你測過沒有開始P的和P完之后的,如果濃度降低,哈哈,那有可能出產(chǎn)物了。 用光吸收的方法測濃度,根本分不清楚dNTP,或者free-primer,還是你PCR得到的primer dimer, nonspecific bands或者你的產(chǎn)物。 而且,原理上說,dNTP的光吸收最高,這個封閉系統(tǒng)如果P出東西來了,光吸收還應該下降。 |
鐵蟲 (正式寫手)
新蟲 (著名寫手)
木蟲 (正式寫手)

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