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自在小雨金蟲 (初入文壇)
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[求助]
請教關(guān)于畢赤酵母搖瓶發(fā)酵的問題 已有2人參與
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| 我現(xiàn)在在做畢赤酵母表達(dá)外源基因的搖瓶發(fā)酵實驗，每隔24小時取樣，測OD值，到第96個小時時，都還正常，可是到120h時，原本應(yīng)該下降的OD突然增加了，而且增加的幅度達(dá)到10左右，未染菌，就大神給個解釋！��！謝謝啦~~ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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需要知道你的生長曲線，大概的OD值變化情況、培養(yǎng)基、表達(dá)的蛋白和表達(dá)方式。能附上大概的發(fā)酵過程最好。 按這個情況，我大膽估計一下，僅為討論，供你參考： 個人初步認(rèn)為是誘導(dǎo)型胞內(nèi)表達(dá)，使用的基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基，碳源簡單不易利用，發(fā)酵前96h菌體生長速度緩慢（15以下）。如果你的情況和我推斷的大致相同，則是比較正常的。碳源不易利用，細(xì)胞生長緩慢，產(chǎn)生的外源蛋白較少，碳源消耗更慢；菌體逐漸適應(yīng)利用此碳源，菌體生產(chǎn)代謝加快，OD值迅速增加。在此情況，誘導(dǎo)96h后蛋白表達(dá)產(chǎn)量也會迅速增加。我之前做過一個外源蛋白的表達(dá)，產(chǎn)量情況與此類似。 組成型表達(dá)盒誘導(dǎo)型胞外表達(dá)出現(xiàn)這種情況的可能性較小。總的來說，還是需要你的更加具體的實驗情況，才好分析。 |
2樓2014-04-14 22:43:42
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9樓2015-01-19 09:28:41
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