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自在小雨金蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
請(qǐng)教關(guān)于畢赤酵母搖瓶發(fā)酵的問(wèn)題 已有2人參與
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| 我現(xiàn)在在做畢赤酵母表達(dá)外源基因的搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，每隔24小時(shí)取樣，測(cè)OD值，到第96個(gè)小時(shí)時(shí)，都還正常，可是到120h時(shí)，原本應(yīng)該下降的OD突然增加了，而且增加的幅度達(dá)到10左右，未染菌，就大神給個(gè)解釋?zhuān)。�！謝謝啦~~ |
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reallpf
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3樓2014-04-14 22:44:42
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【答案】應(yīng)助回帖
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laozuzunzhe: 金幣+10, Thanks！ 2014-04-16 08:51:17
自在小雨(laozuzunzhe代發(fā)): 金幣+10, 感謝應(yīng)助！ 2014-04-16 08:51:58
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需要知道你的生長(zhǎng)曲線(xiàn)，大概的OD值變化情況、培養(yǎng)基、表達(dá)的蛋白和表達(dá)方式。能附上大概的發(fā)酵過(guò)程最好。 按這個(gè)情況，我大膽估計(jì)一下，僅為討論，供你參考： 個(gè)人初步認(rèn)為是誘導(dǎo)型胞內(nèi)表達(dá)，使用的基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基，碳源簡(jiǎn)單不易利用，發(fā)酵前96h菌體生長(zhǎng)速度緩慢（15以下）。如果你的情況和我推斷的大致相同，則是比較正常的。碳源不易利用，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，產(chǎn)生的外源蛋白較少，碳源消耗更慢；菌體逐漸適應(yīng)利用此碳源，菌體生產(chǎn)代謝加快，OD值迅速增加。在此情況，誘導(dǎo)96h后蛋白表達(dá)產(chǎn)量也會(huì)迅速增加。我之前做過(guò)一個(gè)外源蛋白的表達(dá)，產(chǎn)量情況與此類(lèi)似。 組成型表達(dá)盒誘導(dǎo)型胞外表達(dá)出現(xiàn)這種情況的可能性較小。總的來(lái)說(shuō)，還是需要你的更加具體的實(shí)驗(yàn)情況，才好分析。 |
2樓2014-04-14 22:43:42
自在小雨
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4樓2014-04-15 11:04:49
wt3532
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5樓2014-04-15 11:29:44
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