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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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[求助] 求助：pcr 10微升體系跑出條帶很亮，50微升體系跑不出東西已有4人參與

我用兼并引物跑的pcr，有條帶但不亮，我就用pcr產(chǎn)物作為模板跑了個(gè)10微升的巢式pcr，條帶很亮。想做膠回收，就用同樣的方法跑了50微升體系的，結(jié)果什么東西都沒(méi)有，急死人了，求高人指點(diǎn)

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1樓 2014-04-23 10:19:35

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1009238055

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建議樓主還是每次都是用同樣的體系擴(kuò)增吧，不容易出錯(cuò)，大不了多擴(kuò)幾管，回收到一起就OK啦。很方便的，要不然體系一變就各種改條件，很麻煩的。這種情況要是單獨(dú)加樣估計(jì)是加樣的時(shí)候槍的誤差造成各試劑終濃度變了，要是加號(hào)樣分裝可能就像樓上說(shuō)的沒(méi)有混勻啦。

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5樓2015-01-16 20:50:30

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yuren2009

版主

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10微升的多做幾個(gè)不行了？你要是按比例擴(kuò)大的應(yīng)該跑出來(lái)的，成分一定要混勻。

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學(xué)習(xí)使你立于不敗之地

2樓2014-04-23 14:32:23

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hutil1543

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混勻是重點(diǎn)，量大了如果還不勻結(jié)果通常都不好。

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3樓2014-04-24 10:55:28

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jurkat.1640

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myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-24 11:50:18

試劑的比例對(duì)不對(duì)？PCR儀設(shè)置的樣品體積是否與實(shí)際體積匹配？

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4樓2014-04-24 11:02:49

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